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人催乳素ELISA檢測(cè)試劑盒操作程序

更新時(shí)間:2021-08-09      瀏覽次數(shù):907

人催乳素ELISA檢測(cè)試劑盒操作程序

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儲(chǔ)存及有效期:

未開(kāi)封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。

使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。

 

實(shí)驗(yàn)原理:

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

精密度:                                       

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100

批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%

穩(wěn)定性:

經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。

為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。

友情提醒:

試劑盒使用完畢后,請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!


人催乳素ELISA檢測(cè)試劑盒操作程序

操作時(shí)應(yīng)注意:

A. 使用移液器加液與移液槍頭不能混用。

B. 洗板要干凈,避免交叉污染。

C. 嚴(yán)格按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作,反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。

D. 請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成注意做好清潔工作。

E. 不要在測(cè)量過(guò)程中關(guān)閉電源。

F. 對(duì)于因試劑盒問(wèn)題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改酶免測(cè)定試劑盒參數(shù),以達(dá)到zui佳效果。

G. 使用后蓋好防塵罩。

H. 出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家,切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。


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