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大鼠ELISA試劑盒具有靈敏度高、專一性強等優(yōu)點

更新時間:2024-11-23      瀏覽次數(shù):405
大鼠ELISA試劑盒是一種重要的生物學實驗工具,以下是對其的詳細介紹:

一、概念

大鼠ELISA試劑盒是通過酶聯(lián)免疫吸附反應(ELISA)實驗來檢測大鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等樣品中特定生物分子(如蛋白質、抗原等)的含量的試劑盒。通過使用ELISA技術,可以對大鼠樣品中的目標分子進行定量或半定量檢測,具有快速、準確、敏感的特點。

二、大鼠Elisa試劑盒基本原理

1.抗原或抗體與酶的結合:抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性。

2.抗原或抗體的吸附:抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性。

3.酶促反應與顏色變化:酶結合物與相應抗原或抗體結合后,加入底物會產(chǎn)生顏色反應,顏色反應的深淺與標本中相應抗原或抗體的量成正比例,因此可以按底物顯色的程度判定結果。

三、操作步驟

1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔。

2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50µl。加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。

7.再溫育:操作同第3步。

8.再洗滌:操作同第5步。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色。

10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

四、應用領域

1.疾病模型和藥效評價:用于檢測大鼠體內的各種生物分子,如細胞因子、白細胞介素、抗體、荷爾蒙等,這些分子的含量和活性波動與大鼠的生理狀態(tài)和疾病有著密切關系。

2.生物分子檢測:用于研究生物分子在生理和病理條件下的變化和功能。

3.免疫學研究:用于研究大鼠的免疫應答和免疫調節(jié),檢測大鼠體內的抗體、免疫細胞因子等免疫相關分子的含量和活性。

4.藥物篩選:通過檢測藥物對生物分子的影響,篩選出具有潛在治療作用的藥物。

五、優(yōu)點

大鼠ELISA試劑盒具有靈敏度高、專一性強、重復性好、操作簡便等優(yōu)點,使其成為生物醫(yī)學研究中實驗工具。

綜上所述,大鼠ELISA試劑盒在生物醫(yī)學研究中發(fā)揮著重要作用,其應用廣泛且操作簡便,為科研人員提供了有力的支持。 
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